د پولیکریلامایډ جیل الیکٹروفورسیس لپاره احتیاطي تدابیر

· polyacrylamideجیل باید د اکریلامایډ مونومر، پولیمرائزیشن پیل کولو موادو، کتلست، او د مالګې او بفر مخلوط حق سره یوځای شي.

· اکریلامایډاو BIS (N, N' - methylene double acrylamide) د مونومر شکل جیل میټرکس دی.

· امونیم پرسلفیټ د چپکونکي پولیمر کولو پروسه پیل کوي.د ګلو جوړولو لپاره په اوبو کې چمتو شوي 10٪ امونیم پرسلفیټ محلول ته اړتیا ده.ډیری معلومات د فعال کارونې اړتیا ته اشاره کوي.په هرصورت، 10٪ محلول د څو اونیو لپاره په 4℃ کې ساتل کیدی شي پرته له دې چې د پام وړ فعالیت له لاسه ورکړي.تر 10 ملی لیتره پورې جوړ کړئ او کله چې ګولۍ راټولې نشي له مینځه یوسئ.

لارښوونه: سلنهاکریلامایډپه ترتیب کولو کې د ګلو او پروټین ګولۍ یو شان ندي.که چیرې مخکې جوړ شوي اکریلامایډ: د BIS محلول وکاروئ، ډاډ ترلاسه کړئ چې سم بوتل ترلاسه کړئ.

TEMED (N, N, N', N' - tetramethyl ethylenediamine) یو کتلست دی، په نسواري بوتل کې، په یخچال کې ایښودل شوی.د ګلو اچولو دمخه یوازې اضافه کړئ.

· polyacrylamide electrophoresis په الیکٹروفورسیس کې کارول شوي شیشې باید هر ځل مخکې او وروسته ومینځل شي.د الکتروفوریسس وروسته، په ګرمو صابون اوبو کې د نرم برش او ټوکر سره مینځل، د مینځلو اوبو سره مینځل او وچولو لپاره ودریږئ.

· رطوبت او دوړې کولی شي د خالي پولیمر سره رامینځته شي.د الکتروفورسیس څخه دمخه، د شیشې پلیټ د شیشې کلینر سره پاک کړئ او د نرم برش سره یې مسح کړئ.د ککړو اوبو سره مینځل او د کاغذ مسح سره په ښه توګه وچ کړئ.د کاغذ سره مسح کولو دمخه د 70٪ ایتانول سره مینځل د وچولو پاکولو او ګړندي کولو کې مرسته کوي.د اکریلامایډ نمونې په پرله پسې ډول اضافه کړئ: BIS، اوبه، بفر محلول، امونیم پرسلفیټ، TEMED.ښه وخورئ او سمدلاسه یې واچوئ.

دا اړینه نده چې د پولیمرائزیشن دمخه پولیکریلامایډ ډیګاس کړئ.(اکریلامایډ د بلبلونو لرې کولو لپاره په خلا کې کیښودل کیده ځکه چې اکسیجن د پولیمیریزیشن مخه نیسي.)

د افقی ګلو پوائنټ نمونې لارښوونې.

· د تور کاغذ یوه ټوټه په لاندې بکس کې واچوئ، تور پس منظر کې د نمونې سوراخ جوړ کړئ ترڅو نور روښانه وګورئ.
· د ګلو ټانک ډک بفر، یوازې د کولایډ په اوږدو کې.
· که څراغ رڼا ولري، څراغونه وګرځوئ، اجازه راکړئ چې رڼا روښانه شي.نمونه په پایپټ کې رسم کړئ.
· د اتوماتیک پایپټینګ وسیله کارول.
· په 10-200 mu 1 د مایع حرکت نقطه د نمونې په ډیری نقطو کې کارول کیدی شي.د خورا کوچنیو نمونو سوراخونو لپاره (له 10μ1 څخه کم)، د پایپټ اوږد سر چې د ګلو د ترتیب کولو لپاره کارول کیږي ډیر اسانه دی.

· پایپټینګ یوازې په نمونه کې ډوب شوی، ورو ورو حرکت کونکي مایع تنفس کوي.نمونه کیدای شي د ګیلیسرین سره چپکشي ښکاري، او چټک پمپ کول ممکن د پایپټ سر ته د هوا بلبلونه راوباسي.

· نمونې د پایپټینګ سر تنفس کولو وروسته ، د مایع سر په نرمۍ سره د پایپ په څنډه کې حرکت کوي یا د کاغذ مسح کول د څاڅکو څخه بهر د مایع سر چوسوي.پام وکړئ چې نمونه ونه چوسئ.

نمونه د نمونې سوراخ کې ځای په ځای کړئ

· د پایپټینګ وسیله د لږ فشار ساتلو لپاره، نمونې لږ څه د جریان مایع سر ته حرکت ورکړئ.
· د پایپټینګ سر په بفر کې داخل شوی، د ځای سوراخ څخه یو څه لوړ، مثبت فشار ساتي.د پایپټ سر په یو کوچني سوري کې دننه کیدی شي.
· په تدریجي او ثابت ډول نمونې بهر.د پایپټ ټیپ د نقطې نمونې سوراخ څخه پورته کیښودل کیږي، او نمونه به سوري کې ډوب شي.پریږدئ چې نمونه ډوب شي ترڅو د فشار کولو پرځای د نمونې سوراخ ډک کړي.
· کله چې د مایع سر سره د نمونې وروستی څاڅکي، مایع به دویمې پښې ته حرکت وکړي، ورو ورو د مایع حرکت پورته کړي، د بفر څخه بهر حرکت وکړي

د عمودی ګلو نمونه څنګه ترسره کول؟

· د عمودی ګلو پوائنټ نمونه سوراخ د شیشې دوه ټوټو ترمینځ رامینځته شوی.په ډیر پتلی ګوتو کې، د پایپټ سر حتی د شیشې دوه پلیټونو ترمنځ نشي داخل کیدی.ګلیسرین وګورئ!د پایپټ سر د نمونې په سوري کې واچوئ او نمونه به سوري کې ډوب شي.
· د نمونې نقطه مخکې، ډاډ ترلاسه کړئ چې د پولی پروپیلین اکیل جیل نمونې سوراخ عمودی نقطه واچوئ پاک پاک شوی.غیر پولیمر شوي اکریلامایډ او هغه اوبه چې ممکن د نمونې سوري په ښکته کې څرګند شي ومینځئ.اوبه کولی شي د نمونې سوراخ د پام وړ کوچنی کړي.د 25ml یا 50ml سرنج او د 18 ګیج ستنه وکاروئ.په الیکٹروفورسیس بفر کې واچوئ او په احتیاط سره د نمونې سوري فلش کړئ.
· د نمونې سوراخ لیدل ستونزمن کیدی شي، مګر په ورته وخت کې، پاتې نور اسانه دي.که چیرې اضافي سوراخ شتون ولري، د نمونې بفر د بروموفینول نیلي سره ازموینه کیدی شي.